Como Escolher entre HPLC e UHPLC – Diferenças, Vantagens, Desvantagens e Limitações

Como Escolher entre HPLC e UHPLC – Diferenças, Vantagens, Desvantagens e Limitações

HPLC e UHPLC têm aplicações distintas e a escolha ideal depende do equilíbrio entre custo, eficiência e requisitos analíticos.

HPLC e UHPLC têm aplicações distintas e a escolha ideal depende do equilíbrio entre custo, eficiência e requisitos analíticos.

Por Edwin Bueno

Por Edwin Bueno

12 de março de 2025

12 de março de 2025

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A escolha entre Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) e Cromatografia Líquida de Ultra-Alta Eficiência (UHPLC) é uma decisão estratégica para laboratórios de controle de qualidade, pesquisa e desenvolvimento. Cada tecnologia possui características distintas que impactam diretamente na performance analítica, tempo de análise, consumo de solventes e custo operacional.

Diferenças Fundamentais

A principal diferença entre HPLC e UHPLC está na pressão operacional e no tamanho das partículas da fase estacionária:

  • HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) opera normalmente em pressões de até 400 bar e utiliza colunas com partículas de 3 a 5 µm.

  • UHPLC (Ultra-High-Performance Liquid Chromatography) suporta pressões muito mais altas, tipicamente 600 a 1300 bar, permitindo o uso de colunas com partículas menores, entre 1,7 e 2 µm.

Essa redução no tamanho das partículas da fase estacionária aumenta a eficiência da separação e reduz significativamente o tempo de análise.

Vantagens e Desvantagens

Tabela de Características

Limitações e Considerações para Escolha

A decisão entre HPLC e UHPLC deve considerar não apenas a eficiência analítica, mas também fatores operacionais, financeiros e regulatórios. Para facilitar essa escolha, um questionário objetivo pode auxiliar os decisores técnicos na melhor definição do equipamento para suas necessidades.

Questionário para Escolha entre HPLC e UHPLC

1. Qual é o principal objetivo da análise?

  • ( ) Análises rotineiras de controle de qualidade

  • ( ) Desenvolvimento de métodos e pesquisa/Análises de compostos complexos e de baixa concentração


2. Qual é o nível de resolução necessário?

  • ( ) Resolução padrão atende às necessidades do laboratório

  • ( ) Precisamos de separações altamente eficientes e rápidas


3. Quão crítico é o tempo de análise?

  • ( ) Temos flexibilidade no tempo de análise

  • ( ) Precisamos reduzir o tempo de análise para aumentar a produtividade


4. Qual o volume de amostras analisado diariamente?

  • ( ) Baixo a moderado (Até 50 amostras/Dia)

  • ( ) Alto (Mais de 50 amostras/Dia)


5. O laboratório busca reduzir o consumo de solvente e resíduos gerados?

  • ( ) Não é uma prioridade

  • ( ) Sim, buscamos maior sustentabilidade e redução de custos


6. O laboratório já possui infraestrutura para suportar pressões mais altas?

  • ( ) Sim, já trabalhamos com equipamentos de alta performance

  • ( ) Não, nossos sistemas são otimizados para HPLC convencional


7. O orçamento do laboratório permite um investimento inicial mais alto?

  • ( ) Preferimos um investimento menor com custos operacionais mais previsíveis

  • ( ) Estamos dispostos a investir em equipamentos mais caros para maior eficiência analítica


8. O laboratório precisa seguir metodologias já validadas por órgãos reguladores?

  • ( ) Sim, utilizamos métodos padronizados e validados para HPLC

  • ( ) Podemos revalidar métodos para migrar para UHPLC


9. A equipe possui experiência com equipamentos de alta pressão?

  • ( ) Não, nossa equipe está mais acostumada com HPLC convencional

  • ( ) Sim, estamos familiarizados com manutenção e operação de UHPLC


10. A manutenção e o suporte técnico para UHPLC são viáveis para o laboratório?

  • ( ) Temos suporte disponível e equipe treinada

  • ( ) A manutenção especializada pode ser um desafio


Interpretação do Questionário

Se a maioria das respostas for na primeira alternativa, o HPLC é a escolha mais adequada, pois oferece maior robustez, compatibilidade com métodos validados e menor custo inicial.

Se a maioria das respostas for na segunda alternativa, o UHPLC pode ser a melhor opção, pois proporciona maior eficiência, rapidez nas análises e economia de solventes a longo prazo.

Conclusão

HPLC e UHPLC têm aplicações distintas e a escolha ideal depende do equilíbrio entre custo, eficiência e requisitos analíticos. Enquanto UHPLC proporciona análises mais rápidas e detalhadas, HPLC continua sendo a opção mais versátil e acessível para diversas aplicações.

Se o seu laboratório busca maior produtividade e melhor resolução em análises, a UHPLC pode ser o investimento ideal. Mas se a robustez, custo-benefício e compatibilidade com metodologias já validadas são prioridade, o HPLC continua sendo uma excelente escolha.

📌 E você? Seu laboratório já fez a transição para UHPLC ou ainda opera predominantemente com HPLC?


Referências Bibliográficas

  1. Swartz, M. E. (2005). Ultra-Performance Liquid Chromatography (UHPLC): An Overview. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 28(7-8), 1253-1263.

  2. Guillarme, D., Nguyen, D. T., Rudaz, S., & Veuthey, J. L. (2007). Method transfer from conventional to ultra-high-pressure liquid chromatography: A case study. Journal of Chromatography A, 1149(2), 20-29.

  3. Huber, L. (2018). Validation and Qualification in Analytical Laboratories. CRC Press.

  4. Snyder, L. R., Kirkland, J. J., & Dolan, J. W. (2011). Introduction to Modern Liquid Chromatography (3rd ed.). John Wiley & Sons.

  5. European Medicines Agency (EMA) (2014). Guideline on Bioanalytical Method Validation.

  6. United States Pharmacopeia (USP) (2021). USP General Chapter <621> Chromatography.


Edwin Bueno

Edwin Bueno é engenheiro químico com mais de 13 anos de experiência em laboratórios analíticos e ênfase em técnicas cromatograficas, atuando em centenas de projetos de alta complexidade voltados ao controle de qualidade, desenvolvimento de métodos e conformidade regulatória. É fundador e diretor técnico do laboratório analítico Atual Labs, reconhecido por sua atuação ágil nos setores de nutrição e saúde animal.

Além de sua atuação técnica, Edwin é consultor de laboratórios e indústrias, contribuindo na resolução de problemas analíticos, otimização de processos, estruturação de equipes técnicas, expansão laboratorial e gestão, implementação de boas práticas que asseguram qualidade, agilidade e robustez nos resultados.

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